Электрофоре́з белко́в — способ разделения смеси белков на фракции или индивидуальные белки, основанный на движении заряженных белковых макромолекул различного молекулярного веса в стационарном электрическом поле. Электрофорез белков применяют как для анализа компонентов смеси белков, так и для получения гомогенного белка. Наиболее распространенным вариантом электрофоретического анализа белков является электрофорез белков в полиакриламидном геле по Остерман Л. А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: электрофорез и ультрацентрифугирование (практическое пособие). — : Наука, 1981. — 288 с..
Варианты метода электрофореза белков Существует множество разновидностей и модификаций данного метода, которые используются (или использовались в определённые периоды развития биохимии и молекулярной биологии) в различных областях: Электрофорез в свободных средах (без поддерживающей среды) Электрофорез с подвижной границей Зональный электрофорез без поддерживающей среды Зональный электрофорез в поддерживающей среде с капиллярной структурой Электрофорез белков в крахмальном геле Электрофорез белков в полиакриламидном геле (ПААГ) Электрофорез белков в агарозном геле Электрофорез на фильтровальной бумаге Электрофорез белков на ацетат-целлюлозной мембране Электрофорез в колонках и блоках гранулированной поддерживающей среды Капиллярный электрофорез
Электрофорез белков подразделяется также на одномерный и двумерный (2D) электрофорез , препаративный и аналитический, а также электрофорез и электрофорез в присутствии детергента (в денатурирующих условиях). Разновидностью метода электрофореза являются изоэлектрическое фокусирование и изотахофорез. В случае использования иммунологических методов для выявления разделённых белков говорят про иммуноэлектрофорез.
В зависимости от конструкции электрофоретического различают горизонтальный и вертикальный электрофорез белков.
История и области применения После первых экспериментов с электрофорезом, проводившихся в нескольких лабораториях в 1930-е — 1940-е годы, в том числе пионером электрофореза — нобелевским лауреатом Арне Тиселиусом , существенный прогресс в дальнейшем развитии и применении этого метода для разделения белков начался в 1955 году с разработки зонального электрофореза в крахмальном геле, которую осуществил Оливер Смитис, впоследствии также нобелевский лауреат . Метод совершенствовался и получил большое распространение в экспериментальной биохимии и молекулярной биологии.
В 1959 году был предложен метод электрофореза белков в ПААГ, в 1962 году — метод диск-электрофорезаOrnstein L., Davis B. J. Disc Electrophoresis. — , USA: Distillation Products Industries, Eastman Kodak Co., 1962., в 1969 году — применение денатурирующих агентов (SDS) . В 1970 году Лэммли значительно усовершенствовал электрофорез в ПААГ, разделив 28 белковых компонентов бактериофага T4. В 1975 году появился двумерный (2D) электрофорез.
Электрофорез белков нашёл широкое применение в биологических исследованиях, как фундаментальныхHunter R. L., Merkert C. L. Histochemical demonstration of enzymes separated by zone electrophoresis in starch gels // Science. — 1957. — Vol. 125. — P. 1294—1295., так и прикладных . Ряд вариантов метода используется и поныне; например, 2D-электрофорез является в протеомике одним из методов изучения протеома .
См. также Протеом Электрофорез Электрофорез белков в полиакриламидном геле Электрофорез в полиакриламидном геле
Примечания
Литература Vesterberg O. History of electrophoretic methods // . — 1989. — Vol. 480. — P. 3—19.
Ссылки
Категория:Белки Категория:Методы молекулярной биологии