alt=|miniaturadaimagem|283x283px|Visão microscópica de uma cultura de levedura no processo de fissão binaria. Nas Ciências, alguns experimentos são realizados com animais, os quais em sua maioria são organismo-modelos. São considerados como organismo-modelo os adequados para o estudo em questão, possuindo alta capacidade de adaptação, fácil reprodução e crescem rapidamente. De acordo com essas características, muitas bactérias são utilizadas como animais modelos.
As bactérias são seres de fácil manejo, com algumas particularidades que permitem analisar com mais facilidades algumas mutações e são pioneiras na clonagem genética. Com isso, um organismo que possui muitas das características citadas das bactérias, são as leveduras, com a vantagem de ser um organismo eucarionte, se tornando um modelo ideal para muitas pesquisas científicas. Elas possuem células pequenas, crescem em grande quantidade em meio líquido, possuem reprodução tanto sexuada quanto assexuada, produzem colônias permitindo rastreamento de mutações, plaqueamento em réplica e ainda possuem plasmídeos (o que facilta a manipulação genética). Além disso, elas possuem os dois modos de respiração, tanto aeróbia, quanto anaeróbia por meio da fermentação.
Levedura é um termo geral utilizado que engloba alguns tipos de fungos unicelulares, sendo que duas principais leveduras utilizadas como organismo modelo são Saccharomyces cerevisiae e Schizosaccharomyces pombe, cada uma delas possuindo diferentes funcionalidades, servindo para fins específicos nas pesquisas.
Principais leveduras: Saccharomyces cerevisiae e Schizosaccharomyces pombe miniaturadaimagem|Saccharomyces cerevisiae em microscopia de contraste de interferência diferencial (DIC). A levedura Saccharomyces cerevisiae é um fungo unicelular, da classe dos Saccharomycetes. Essa espécie possui 16 cromossomos, os quais abrigam cerca de 12 mil quilobases (kb) de DNA genômico nuclear. Suas células são arredondadas, com cerca de 7 micrometros e sua reprodução ocorre por meio de brotamento. Comumente, essa levedura é utilizada como organismo modelo em pesquisas em biologia molecular e, também na panificação, na produção de vinhos e de cervejas e é conhecida por nomes que fazem referência a tais funções, como: levedura do pão. Na natureza, esses organismos são, geralmente, encontrados em frutas maduras, como as uvas. As células das leveduras podem ter dois formatos de vida: a forma haploide (ou assexuada), onde se tem um ciclo de vida simples, porém, com maior risco de morte por estresse; e sua forma diploide (ou sexuada), a qual também possui ciclo de vida simples, mas com a diferença de que, em situações de estresse, essas células podem sofrer esporulação como forma de defesa e, assim, produzindo quatro esporos que poderão ser utilizados para reprodução. esquerda|miniaturadaimagem|Schizosaccharomyces pombe em microscopia eletrônica de varredura. A levedura Schizosaccharomyces pombe também é um fungo unicelular, porém pertence à classe dos Schizossaccharomycetes. Esses organismos são utilizados para produção de cerveja tradicional, além de serem usados como organismos modelo na biologia molecular. Seu genoma é dividido em apenas 3 cromossomos, que carregam cerca de 13 mil kb de DNA. Além disso, essa espécie possui alguns genes compartilhados com humanos, o que a diferencia e a torna um sistema experimental complementar da S. cerevisiae.
Suas células, diferentemente do outro organismo mencionado, possuem formato de bastonetes e medem cerca de 10 micrometros de comprimento. Essas células se dividem por fissão binária, dando origem sempre a duas células-filhas de tamanho igual, explicando assim, seu nome popular: levedura de fissão.
E por que leveduras? miniaturadaimagem|Processo de reprodução por brotamento de Saccharomyces cerevisiae, visto em microscópio. As leveduras utilizadas como organismos-modelo apresentam algumas características em sua biologia que as fazem ser ideais para uso em estudos de diversas áreas. Uma das características importantes é de que o ciclo de vida dessas leveduras são curtos e rápidos, sendo que há cada 90 minutos, uma cultura dobra sua massa celular . O ciclo de vida de Saccharomyces cerevisiae, por exemplo, é diplobionte e há reprodução vegetativa por mitoses durante cada uma das fases do ciclo (haplóide e diplóide).GRIFFITHS, Anthony JF et al. Introdução à genética. In: Introdução à genética. 2006. p. 743-743. Além disso, essas leveduras são organismos não-patogênicos de fácil manipulação genética, o que possibilita a geração e análise de mutantes com alteração no genoma mitocondrial ou nuclear. Essas leveduras apresentam um característico processo de recombinação homóloga, importante para estudos de biologia celular. O genoma das leveduras também é um aspecto importante nessa escolha, já que elas são consideradas uns dos organismos eucarióticos mais simples existentes.https://microbiologia.icb.usp.br/cultura-e-extensao/textos-de-divulgacao/micologia/genetica-e-biologia-molecular-de-fungos/saccharomyces-cerevisiae-o-modelo/ Em leveduras também ocorre repressão catabólica, que é um processo de inibição da transcrição de diversos genes quando esses organismos são cultivados em fontes de carbono facilmente fermentáveis, o que permite o estudo de mecanismos de repressão genômica e outros processos do material genético.GELADÉ, Ruud et al. Multi-level response of the yeast genome to glucose. Genome biology, v. 4, n. 11, p. 1-5, 2003. Todas essas características foram importantes para que, em 1996,GOFFEAU, André et al. Life with 6000 genes. Science, v. 274, n. 5287, p. 546-567, 1996. o genoma de S. cerevisiae fosse sequenciado, o que passou a ser mais um motivo pelos quais esse levedo é utilizado em estudos como um organismo-modelo. A biologia amplamente conhecida das leveduras bem como o fato delas serem seres eucariotos e relativamente simples foram o que culminou na escolha desses organismos como modelos, o que ampliou seu uso em experimentos e nas indústrias, sendo que hoje encontramos estudos com S. cerevisiae, por exemplo, em diversos ramos de pesquisa e indústria.
Áreas de contribuição miniaturadaimagem|Vinho, um alimento que utiliza leveduras em seu processo de fermentação. O processo de fermentação das leveduras, principalmente de Saccharomyces cerevisiae, é de extrema importância para diversas indústrias, como a alimentícia. S. cerevisiae é o principal micro-organismo utilizado em processos industriais de fermentação alcoólica. A aplicação de desses organismos na produção de bebidas e alimentos fermentados acompanha a história do desenvolvimento cultural, tecnológico e científico da humanidade. Durante a fermentação do vinho, a levedura é responsável pela síntese de compostos aromáticos, como ésteres voláteis, ácidos orgânicos e alcoóis superiores, que determinam a constituição e as características primordiais desta bebida e ditam a complexidade do sabor e aroma dessas bebidas. Além disso, perfis aromáticos diversificados são obtidos a partir de diferentes métodos de produção, sendo formados principalmente, pela transformação química da uva durante a fermentação alcoólica. As leveduras também são utilizadas para a fermentação em massas como o pão, sendo que o gás carbônico liberado por esses organismos é o responsável pelo crescimento dos pães. As leveduras ainda são utilizadas na produção de cervejas e são ricas em proteína, sais minerais, carboidratos e vitamina B e, por isto, também são usadas para enriquecer as dietas humana e animal.SALINAS, R.D. Alimentos e nutrição: introdução à bromatologia. 3.ed. Porto Alegre: Artmed, 2002. 278p. Na indústria de base, o principal composto formado pelas leveduras é o etanol,STAMBUK, Boris U. et al. Industrial fuel ethanol yeasts contain adaptive copy number changes in genes involved in vitamin B1 and B6 biosynthesis. Genome research, v. 19, n. 12, p. 2271-2278, 2009. um combustível extremamente importante nas matrizes energéticas mundiais. O etanol também é formado pelo processo de fermentação, sendo que centenas de quilos ou, às vezes, toneladas de leveduras são adicionadas a uma grande quantidade de mosto - o açúcar diluído -, onde realizarão o processo de respiração anaeróbica, que levará a formação do etanol. As características essenciais das leveduras que as fazem ser organismos-modelo bem como sua grande aplicação em diversos ramos da indústria mundial tornam esse organismo muito importante comercialmente e cientificamente e, por isso, diversas linhas de pesquisa acerca das leveduras são realizadas. Atualmente, o principal objetivo dos cientistas que pesquisam sobre essas leveduras focam em entender quais são as variantes, ou seja, quais linhagens de leveduras são as melhores nos processos fermentativos. O objetivo desse tipo de pesquisa é melhorar o aproveitamento e aumentar a produção dos insumos citados, como pode-se ver na pesquisa de Reis (2011), onde procura-se realizar uma caracterização de linhagens selvagens de S. cerevisiae isoladas de processos fermentativos para produção de etanol.
Sequenciamento do genoma Em 1996, a levedura Saccharomyces cerevisiae foi o primeiro organismo eucarioto a ter seu genoma completamente sequenciado, projeto que contou com a ajuda de cerca de 600 pesquisadores na Europa, América do Norte e Japão. A sequência de 12.068 kilobases define 5885 genes codificadores de proteína, sendo aproximadamente 140 genes que especificam RNA ribossomal, 40 genes para pequenos RNA nucleares (snRNAs) e 275 genes de RNA de transferência (tRNA). Além disso, foi estabelecido que a levedura possui 16 cromossomos haploides. Uma das vantagens que permitiu com que S. cerevisiae tivesse seu genoma completamente sequenciado é a combinação do grande número de cromossomos e um tamanho de genoma pequeno, sendo possível dividir as responsabilidades do sequenciamento de forma conveniente entre os diferentes grupos internacionais que estavam envolvidos no projeto. miniaturadaimagem|297x297px|Saccharomyces cerevisiae O sequenciamento completo do genoma definiu a existência de 5885 ORFs (open reading frames) que especificam produtos de proteínas na célula da levedura. Isso significa que um gene que codifica proteína é encontrado a cada 2 kb do genoma da levedura, sendo que quase 70% da sequência total consiste em ORFs.
A partir do sequenciamento, foi possível obter, pela primeira vez, o proteoma completo de uma célula eucariótica. O proteoma descreve o conjunto completo de proteínas que uma célula viva é capaz de sintetizar. Por meio de análise computacional, foi possível classificar cerca de 50% das proteínas com base em na similaridade de sequência de aminoácidos com a de outras proteínas já conhecidas, usando o critério de homologia conservativa. Entretanto, isso permite entender apenas uma descrição geral da função bioquímica da proteína, mas não indica seu papel biológico. Na tentativa de classificar as proteínas de levedura de acordo com sua função, foram utilizados os microprocessadores MIPs. A célula de levedura utiliza 11% do proteoma para seu metabolismo; 3% para produção de energia e armazenamento; 3% para replicação, reparo e recombinação do DNA, 7% para transcrição; e 6% para tradução.
Acreditava-se que entender o proteoma de leveduras era um dos passos para entender melhor o complexo proteoma humano, já que aproximadamente metade das proteínas defeituosas em doenças hereditárias humanas possuem alguma sequência de aminoácidos similares à proteínas de levedura. Embora seja evidente que o genoma humano possui diversas proteínas que não são encontradas no proteoma de levedura, é justo sugerir que a maioria das proteínas de levedura possuem homólogos humanos. Assim, essas proteínas humanas poderiam ser classificadas de acordo com sua equivalência estrutural e funcional às existentes no proteoma de levedura.