dCTP-pirofosfataza 1 je enzim koji je kod ljudi kodiran genom DCTPP1.
DCTPP1 pripada porodici pirofosfataza koje smanjuju ćelijkni bazen deoksiribonukleozid-trifosfata (dNTP) tako što ih razgrađuju u svoje dNMP oblike. Ovi enzimi također ciljaju nekanonske NTP i genotoksične NTP, poput oksidiranih analoga dCTP.
Hartz (2014) mapirala je gen DCTPP1 na kratkom (p) kraku hromosoma 16, regija p11.2, na osnovu poravnanja sekvence DCTPP1 (GenBank BC001344) sa genomskom sekvencom (GRCh37)
Aminokiselinska sekvenca Dužina polipeptidnog lanca je 170 aminokiselina, a molekulska težina 18.681 Da . 1020304050 MSVAGGEIRGDTGGEDTAAPGRFSFSPEPTLEDIRRLHAEFAAERDWEQF HQPRNLLLALVGEVGELAELFQWKTDGEPGPQGWSPRERAALQEELSDVL IYLVALAARCRVDLPLAVLSKMDINRRRYPAHLARSSSRKYTELPHGAIS EDQAVGPADIPCDSTGQTST Kloniranje i ekspresija Requena et al. (2014) klonirali su ljudski DCTPP1, koji kodira protein sa tipslom domenom MazG pirofosfohidrolaze i katalitski ostatak, glu63, za koji se predviđa da veže Mg (2+). Imunofluorescentna konfokalna mikroskopija otkrila je DCTPP1 u citosolu, jedru i mitohondrijama ljudskih ćelijskih linija, sa specifičnom distribucijom ćelijskog tipa među njima. Funkcija gena Upotrebom prečišćenog proteina označenog epitopom, eksprimiranog u E. coli, Requena et al. (2014) otkrili su da je rekombinantni ljudski DCTPP1 pokazao aktivnost pirofosfohidrolaze prema navodnom supstratu, dCTP, formirajući dCMP i oslobađajući anorganski pirofosfat (PPi). DCTPP1 je imao slabiju aktivnost protiv dTTP-a i dATP-a, ali nije imao aktivnosti protiv dGTP-a. DCTPP1 je takođe hidrolizirao nekoliko fiziološki relevantnih dCTP derivata modificiranih baza, uključujući halogenirane i oksidirane oblike. PPi i dCDP inhibirali su hidrolizu dCTP pomoću DCTPP1. Mutacija predviđenog mjesta vezanja Mg (2 +), glu63, na glicin je ukinula aktivnost DCTPP1. Nokdaun DCTPP1 u ljudskim ćelijskim linijama putem male interferirajuće RNK nije imao efekta na proliferaciju ćelija, ali je uzrokovao povećani unutarćelijski dCTP i povećanu osetljivost ćelija na genotoksične analoge dCTP-a, u poređenju sa kontrolama. Dodavanje deoksicitidina, koji putem pretvaranja može preći u dCTP, povećao je ekspresiju DCTPP1 u normalnim ljudskim fibroblastima i HeLa ćelijama. U sinhroniziranim HeLa ćelijama, ekspresija DCTPP1 povećala se tokom mitoza, što sugerira da DCTPP1 doprinosi eliminaciji viška dCTP nakon sinteze DNK.Requena, C. E., Perez-Moreno, G., Ruiz-Perez, L. M., Vidal, A. E., Gonzalez-Pacanowska, D. The NTP pyrophosphatase DCTPP1 contributes to the homoeostasis and cleansing of the dNTP pool in human cells. Biochem. J. 459: 171-180, 2014. PubMed: 24467396
Također pogledajte Dezoksicitidin-trifosfat (dCTP)]] Transaktivacija
Reference
Dopunska literatura
Vanjski linkovi
Kategorija:Geni na hromosomu 16 Kategorija:Ljudski proteini Kategorija:Proteomika