W budynku znajdują się czytelnie: Biblioteki Prawniczej (Law Library Reading Room), Czasopism (Newspaper and Current Periodical Reading Room), Geograficzna i Map (Geography and Map Reading Room), Sztuki (Performing Arts Reading Room), Druków i Fotografii (Prints and Photographs Reading Room), Filmowo-Telewizyjna (Motion Picture and Television Reading Room), Rękopisów (Manuscript Reading Room), Nagrań Dźwiękowych (Recorded Sound Reference Center).
Packard Campus for Audio-Visual Conservation Najnowszy budynek Biblioteki Kongresu został otwarty w roku 2007 w Culpeper, w stanie Wirginia. Umieszczono tam zbiory: wizualne, dźwiękowe, filmy, taśmy telewizyjne. Są one bezpłatnie udostępniane w sali do wyświetlania filmów.
Zbiory W zbiorach biblioteki znajdują się między innymi: Biblia Gutenberga, pierwsza książka wydana w Stanach Zjednoczonych – The Bay Psalm Book (1640 Cambridge, Massachusetts), zbiory prywatnych bibliotek, m.in. Adolfa Hitlera, Susan B. Anthony, Theodora Roosevelta i rosyjskiej rodziny carskiej, kolekcja kieszonkowych globusów, najmniejsza książka świata – Old King Cole.