Produkcja 25. godzina to drugi, po wyróżnianym Rób, co należy, obraz wyreżyserowany przez Spike’a Lee rozgrywający się w ciągu jednego dnia. Za scenariusz posłużyła doceniana przez krytyków powieść Davida Benioffa napisana w 2001 roku. Jeszcze przed jej publikacją prawa do ekranizacji kupiło Industry Entertainment i stawiający pierwsze kroki w roli producenta aktor Tobey Maguire. Sam autor został zaangażowany do napisania scenariusza na podstawie własnej powieści.
Na planie spotkała się sprawdzona i zgrana ekipa filmowa, która z reżyserem 25. godziny współpracowała w poprzednich jego produkcjach – kompozytor Terence Blanchard, projektantka kostiumów Sandra Hernandez i montażysta Barry Alexander Brown. Spike Lee zatrudnił także operatora Rodriga Prieto, twórcę zdjęć do takich filmów jak Frida czy 8. Mila.
Od czasu nakręcenia Malarii, Lee współpracuje z Terence’em Blanchardem. Kompozytor nagrywał swoją partyturę w Londynie. Do pomocy zatrudnił osiemdziesięciu muzyków z Królewskiej Orkiestry Filharmonicznej i Londyńskiej Orkiestry Symfonicznej.